心血管系统疾病论文_自噬相关基因Rubicon缺失
文章目录
文章快速阅读：
文题释义：
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
1.1 设计
1.2 时间及地点
1.3 材料
1.3.1 实验动物
1.3.2 试剂
1.4 方法
1.4.1 小鼠基因型鉴定
1.4.2 组织学方法
1.4.3 组织总RNA提取及荧光定量PCR
1.4.4 Western blot
1.5 主要观察指标
1.6 统计学分析
2 结果Results
2.1 Rubicon基因表达情况
2.2 Rubicon基因缺失改善心脏细胞衰老引起的细胞重塑
2.3 Rubicon基因缺失减少小鼠心脏衰老相关β-半乳糖苷酶阳性细胞
2.4 Rubicon基因缺失降低心脏SASP因子表达
2.5 Rubicon基因缺失对细胞衰老调控蛋白p53和p16表达的影响
3 讨论Discussion
文章摘要:背景:心脏衰老是心脏疾病的主要危险因素之一,而细胞衰老是心脏衰老的主要机制,在衰老相关心脏疾病中起重要作用。作者前期工作发现自噬相关基因Uvrag缺失促进小鼠心脏细胞衰老,Rubicon是Uvrag的抑制性互作蛋白,其对小鼠心脏细胞衰老的作用尚不明确。目的:探讨Rubicon基因对心脏细胞衰老的影响。方法:使用15月龄野生型小鼠、Rubicon基因缺失小鼠、Uvrag基因缺失小鼠作为观察对象,其中Uvrag基因缺失小鼠作为阳性对照。采用荧光定量PCR检测小鼠心脏组织衰老相关分泌表型相关因子mRNA表达变化,苏木精-伊红染色、天狼猩红染色、衰老相关β-半乳糖苷酶染色进行心肌组织学观察,蛋白免疫印迹检测小鼠心脏组织p53和p16蛋白表达量。实验方案经上海交通大学动物实验伦理委员会批准。结果与结论:（1）苏木精-伊红染色和天狼猩红染色结果显示,Rubicon基因缺失改善了衰老过程中心肌细胞重塑及心脏纤维化;（2）衰老相关β-半乳糖苷酶染色发现,Rubicon基因缺失小鼠心脏衰老细胞较野生型对照组显著减少（P <0.05）;（3）荧光定量PCR结果表明,Rubicon基因缺失小鼠心脏白细胞介素1β、白细胞介素6、转化生长因子β和Ⅲ型胶原α1链、基质金属蛋白酶组织抑制因子1 mRNA表达量较野生型对照组显著下调（P <0.05）;（4）免疫印迹结果显示,Rubicon基因缺失导致心脏组织衰老调控关键基因p53表达较野生型对照组显著降低（P <0.05）;（5）提示Rubicon基因缺失可显著抑制小鼠心脏细胞衰老并延缓心脏衰老,Rubicon是潜在的抑制心脏细胞衰老、抗心脏衰老及衰老相关心脏疾病的靶分子。
文章关键词:
